PLÁSMIDOS CONJUGATIVOS QUE CONFIEREN RESISTENCIA A β-LACTÁMICOS EN CEPAS DE ENTEROBACTERIAS

Abstract

El propósito de este trabajo fue analizar la presencia de plásmidos conjugativos que portan genes de resistencia a β-lactámicos en cepas de enterobacterias, aisladas de pacientes con infecciones intrahospitalarias, del Hospital Universitario “Antonio Patricio Alcalá”, Cumaná, estado Sucre, durante el período comprendido entre septiembre y noviembre de 2005. La extracción de los plásmidos conjugativos se realizó en ocho cepas de enterobacterias y sus respectivas transconjugantes, obtenidas previamente mediante conjugación bacteriana; para tal fin se empleó el método de lisis alcalina con fenol- cloroformo y el estuche Wizards Plus SV Minipreps (Promega). Para obtener el perfil de restricción de los plásmidos, el ADN plasmídico fue digerido con las enzimas EcoRI y NheI. La presencia de los genes que codifican resistencia a β-lactámicos se realizó empleando la técnica de Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) con el uso de iniciadores específícos para los genes blaSHV y blaTEM. Se logró aislar plásmidos, mediante el método de lisis alcalina con fenol cloroformo, en todas las cepas donantes, pero no se aisló en cuatro transconjugantes, mientras que con el método de extracción estuche Wizards Plus SV Minipreps (Promega) se obtuvo aislamiento plasmídico en las ocho cepas donantes y en seis transconjugantes. El análisis de restricción de los plásmidos no permitió definir ningún perfil en las cepas, ya que no se produjeron cortes con las enzimas empleadas. En seis aislamientos plasmídicos se logró obtener amplificación para el gen blaSHV, y en dos la presencia del gen blaTEM. Los resultados revelan la existencia de plásmidos conjugativos en cepas de enterobacterias que portan genes de resistencia a β-lactámicos.