IDENTIFICACIÓN POR PCR Y SUSCEPTIBILIDAD ANTIMICROBIANA DE CEPAS DE Escherichia coli DIARREOGÉNICAS, AISLADAS DE NIÑOS CON DIARREA AGUDA EN CUMANÁ, VENEZUELA

Abstract

Con la finalidad de establecer la prevalencia de cepas de E. coli patógenas asociadas a casos de diarrea aguda infantil en Cumaná, se tomaron muestras de heces de 200 niños con enfermedad diarreica aguda (EDA), de ambos sexos, menores de 5 años, que acudieron al Hospital de Cumaná, y 30 muestras de heces de niños de ambos sexos y en el mismo grupo de edad, que no presentaron cuadro diarreico, para ser usados como control. El aislamiento e identificación de las cepas bacterianas se realizó por métodos bioquímicos convencionales. Para la identificación de los genes de patogenicidad se empleó la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), determinando la presencia de los genes eae y bfp para E. coli enteropatógena (ECEP), st y lt para E. coli enterotoxigénica (ECET), ipaH y virF para E. coli enteroinvasiva (ECEI), Sxt1 y Sxt2 para E. coli shigatoxigénica (ECST), aafII para E. coli enteroagregativa (ECEA), y daaE para E. coli de adherencia difusa (ECAD). La susceptibilidad a los antibióticos se efectuó por la técnica de difusión en placa. Además se aplicó encuesta para la obtención de datos clínicos y epidemiológicos de interés. Los datos obtenidos fueron procesados por estadística descriptiva porcentual y la prueba Chicuadrado a un 95% de confiabilidad. De los 200 niños con EDA, se aisló E. coli de 169, y de los 30 niños controles, se aisló E. coli de 25 de ellos. Por PCR se determinó que de las cepas de E. coli aisladas de niños con EDA, el 10,65% fueron positivas para ECEP, 5,91% para ECET, 1,78% fueron ECEA y 0,59% se correspondieron a ECEI, no se hallaron cepas ECST ni ECAD. En las cepas de E. coli aisladas de niños control no hubo amplificación por PCR de ninguno de los genes de patogenicidad evaluados. Al realizar la distribución porcentual de acuerdo a la edad, y el porcentaje de aislamientos de cada tipo de E. coli diarreogénica (ECD), se hallaron diferencias estadísticas no significativas (p > 0,05), sin embargo, en la distribución porcentual de acuerdo al sexo y el porcentaje de aislamientos de cada ECD, se encontraron diferencias estadísticas significativas (p < 0,05), observándose que los "patotipos" ECEP, ECEA y ECEI tuvieron mayor porcentaje de aislamientos en niños del sexo masculino, mientras que ECET fue mayormente aislada del sexo femenino. De los niños con enfermedad diarreica aguda, además de ECD se aislaron otros géneros bacterianos patógenos entéricos: Salmonella sp (5,92%) y Campylobacter sp (2,96%). Otros géneros bacterianos no patógenos o de dudosa patogenicidad encontrados asociados a E. coli en los niños con EDA fueron: Citrobacter sp, Klebsiella sp, Enterobacter sp, Serratia sp, y Proteus sp, en un 57% de los casos. Se evaluó la susceptibilidad de las cepas a los antimicrobianos: ciprofloxacina (Cf), gentamicina (CN), aztreonam (ATM), tetraciclina (TE), sulfametoxazol/trimetoprim (SXT), imipenem (IPM), cefixima (CFM), ampicilina/sulbactam (SAM). Las ECD mostraron mayor resistencia a los antibióticos SAM, TE y SXT. El tipo de alimentación de estos niños no se asoció con la aparición de un tipo en particular de ECD, pero los mayores porcentajes de aislamiento de estas cepas se hallaron en niños alimentados con leche no materna más otros alimentos. La mayoría de los niños con ECD se encontraron en las clases obrera y marginal. En vista a que E. coli diarreogénica tiene una alta asociación con EDA en niños de Cumaná (18,93%), debe dársele mayor importancia a su identificación en los coprocultivos, a fin de lograr un mejor manejo y control de esta afección tanto en niños como en adultos.