ACTIVIDAD BIOLÓGICA IN VITRO Y DOSIS LETAL CINCUENTA DEL VENENO DE Thalassophryne maculosa (PISCES, BATRACHOIDIDAE)

Abstract

El envenenamiento causado por el pez Thalassopryne maculosa, produce manifestaciones clínicas fundamentalmente inflamatorias, conllevando en ciertas ocasiones a lesiones muy severas e incapacitantes, aunque generalmente no letales. A pesar de ello, muchos de los componentes responsables de tales efectos no han sido estudiados ni identificados con precisión. Por lo tanto, se hace necesario el estudio de algunos efectos biológicos in vitro e in vivo del veneno del “pez sapo cano” Thalassophryne maculosa (Pisces, Batrachoididae). Se determinó la concentración de proteínas en la fracción soluble mediante espectrofotometría. La actividad biológica de los venenos fue ensayada luego de su inyección intraperitoneal en ratones hembra, homocigotos, cepa C57BL/6. La letalidad fue cuantificada a través de la dosis letal cincuenta (DL50), determinada según el método de Dixon y Mood, para 60 minutos de experimentación; calculada como el valor de la mediana obtenida el método no paramétrico de Hodges y Lehmann. El efecto clínico de los venenos se evaluó observando el curso temporal de toxicidad aguda experimental. La actividad proteolítica del veneno se estudió con diluciones sucesivas, colocadas sobre gel radiográfico para evidenciar la digestión de la gelatina. La actividad fosfolipasa se precisó mediante la emulsión de volúmenes determinados de yema de huevo y buffer Tris incubándose con diferentes concentraciones del veneno para cuantificar el tiempo de coagulación. Se obtuvo una cantidad total de proteínas de 79,41 mg mediante ordeño manual de 20 ejemplares. El índice de letalidad (en mg.kg-1) del veneno de T. maculosa fue de 70,80 (66,95-75,12) mg.kg-1; el índice de variabilidad fue de 7,02%. El tiempo de aparición de las manifestaciones clínicas inducidas por el veneno fue gradual presentando de forma inmediata hiperactividad y taquipnea, seguida de hipoactividad y distensión abdominal para suceder, alrededor de los 30 minutos del curso temporal de toxicidad, periodos de bradipnea/apnea a la cual sobreviene la muerte o en algunos casos la sobrevida de los ratones. La actividad proteolítica evidenció digestión de gelatina hasta una dilución 1:64 y la actividad de fosfolipasa, fue comprobada por prolongación en el tiempo de coagulación de una emulsión de yema de huevo, solo a la mayor concentración de veneno utilizada (8,0 mg.mL-1). Al comparar el índice de letalidad del veneno de T. maculosa con diferentes especies de escorpiones y serpientes se evidencia baja potencia letal del veneno de T. maculosa, con marcada diferencia con relación a la letalidad del grupo del veneno de las víboras y artrópodos, superado únicamente por la DL50 del veneno del escorpión R. laticauda. La actividad proteolítica exhibida por este veneno es baja en comparación con la mayoría de los vipéridos; solo poco mayor que la ostentada por Crotalus durissus ruruima o la de Crotalus durissus pifanorum. Los resultados aquí expuestos; permitirían iniciar la caracterización e identificación de algunos componentes proteicos presentes en este veneno que podrían poseer aplicaciones biotecnológicas, principalmente en el campo de la farmacología.